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蛋白交聯(lián)劑可分為三大類你知道嗎?

更新時間:2021-05-27點擊次數(shù):1387
   蛋白交聯(lián)劑是一類小分子化合物,具有2個或者更多的針對特殊基團(-NH2、-COOH、-HS等)的反應性末端,可以和2個或者更多的分子分別偶聯(lián),從而使這些分子結合在一起。70年代時人們普遍使用戊二醛作為蛋白質(zhì)交聯(lián)劑連接抗體和指示劑(如酶類),但其缺點是由于交聯(lián)基團是隨機的,容易形成雜亂的多聚體。80年代,更具選擇特異性的交聯(lián)劑,例如NHS(針對-COOH)和馬來酰亞胺(針對-HS)在生命科學研究中得到了更為廣泛的應用。巧妙地運用交聯(lián)劑可以在蛋白質(zhì)相互作用研究,免疫學,癌癥治療等領域取得意想之外的收獲。截至2010年,市面常用的蛋白質(zhì)交聯(lián)劑大約有一百多種。
  蛋白交聯(lián)劑分為三大類:同源交聯(lián)劑,異源交聯(lián)劑,光反應交聯(lián)劑。
  同源交聯(lián)劑:具有兩個相同活化反應基團。應用:一步反應,分子內(nèi)交聯(lián),多聚反應,穩(wěn)定四級結構
  異源交聯(lián)劑:具有兩個不同活化反應基團。應用:兩步反應交聯(lián),可減少聚集和自身交聯(lián)。
  光反應交聯(lián)劑:反應原則:首先交聯(lián)不穩(wěn)定的熱反應活性基團(與第—種蛋白質(zhì)),然后UV交聯(lián),將第—種蛋白質(zhì)交聯(lián)到第二種蛋白質(zhì)的N-H,C-H上。特點:交聯(lián)非特異性,產(chǎn)率低。
  大多數(shù)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)結合相互作用是瞬時的,通過交聯(lián)方法可以穩(wěn)定或連接相互作用復合物中的成分,從而有助于鑒別這些瞬時接觸。一旦相互作用的成分被共價偶聯(lián),可以使用其他步驟(例如細胞裂解,親和純化和電泳)來制備分析樣品,同時可維持初的相互作用復合物。